本研究通过酵母双杂交筛选,鉴定到 CRY1 可以与 SWR1 复合物关键亚基 SWC6、ARP6 结合,共同以蓝光依赖模式调控 H2A.Z 在染色质的沉积。蓝光***的 CRY1 可以增强 SWC6 与 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以与 SWC6、ARP6 结合,将 SWR1 复合物募集到 HY5 靶向位置,调控 HY5 靶基因的表达,进而影响拟南芥下胚轴的伸长据此,本研究提出拟南芥光形态建成调控的分子机制:CRY1 通过增强 SWR1 复合物活性和 HY5 介导 SWR1 复合物向 HY5 靶基因的募集,共同促进 H2A.Z 染色质沉积,以调控 HY5 靶基因的表达和蓝光条件下光形态建成。筛选酵母文库选欧易生物技术可靠服务高效多年经验。江苏欧易生物酵母文库做什么
通过酵母双杂交文库进行了互作蛋白的筛选,结果显示TaTIFY9可以与TaSRL1相互作用(下图A),并通过Bi-FC、荧光互补实验得以证实(图B-C)。TaTIFY9属于茉莉酸信号途径关键因子JAZ家族的成员之一。RT-PCR显示TaTIFY9也主要表达于小麦根部,外源施加茉莉酸可以***诱导TaTIFY9表达。这一结果表明,TaSRL1可能通过与TIFY9结合介导了茉莉酸对根生长的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特异性结合到靶基因启动子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 属于 ERF 家族。在生长素转运基因 TaPIN2 的启动子序列中含有一个 GCC-box 序列。酵母单杂交实验显示,TaSRL1 可以直接与 TaPIN2 启动子结合并***其表达(图 A),但该***作用会被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制(图 B和C)。江苏欧易生物酵母文库做什么酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸。
进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高表达水平(图a-b)。spk敲除突变体种子中垩白率的增加(图c-e),但粒形和粒重与野生型没有***差别。
文库筛选做的好,培养基和转化试剂少不了。实验做不出、克隆生长不正常的小伙伴,你是不是会怀疑培养基配的有问题,或者转化试剂配的不对?欧易生物现隆重推出酵母双杂、单杂筛选、一对一互作验证的配套培养基、转化试剂啦~该系列产品,经欧易生物实验室多年使用、不断改良,质量保证,物美价廉。所有培养基均无需调pH,使用方便。*需将1袋**包装的培养基溶于500mlddH2O中,然后121℃高压灭菌15min,固体培养基冷却至50℃左右即可倒板使用,液体培养基冷却至室温后直接使用。从现在开始再也不用为重复配制试剂、重复做实验、不停的花费时间验证而头秃了。酵母文库产品线由7个实验室组成,分别有RNA抽提室,RNA质检室、酵母建库室、筛库室等。
蛋白被泛素化后(即蛋白上结合了泛素),意味着将要被运往蛋白酶体降解,一般用于降解细胞内老弱病残蛋白,再回收利用。同时也被用于排除异己,抵御外敌。该过程需要一系列酶介导:泛素***酶(E1)、泛素偶联酶(E2)和泛素E3连接酶(E3)。其中E3是起特异性识别作用的,即决定谁该被降解,不能把好同志降解掉。所以E3基因很多,植物中主要有四种类型:HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**丰富的E3连接酶。本研究中,通过酵母双杂交筛选到的标题蛋白MdBT2,整好是CRLs亚家族之一。因此作者推测MdBT2可能在与ApNMV1a结合后,起到了促进其泛素化和降解的作用。欧易生物21天极速建库,一个文库可以同时做单杂、双杂、三杂,化药小分子筛选。江苏欧易生物酵母文库做什么
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欧易酵母文库助力苹果花青素合成调控机制研究。近日,山东农业大学郝玉金、由春香教授为共同通讯作者,在ThePlantJournal(IF:6.141)期刊发表了题为“JasmonateinducesanthocyaninandproanthocyanidinbiosynthesisinapplebymediatingtheJAZ1-TRB1-MYB9complex”的研究论文,报道了茉莉酸通过介导JAZ1-TRB1-MYB9复合物诱导苹果中花青素和原花青素的生物合成。山东农业大学安建平博士为***作者,文章中酵母文库实验由欧易生物协助完成。江苏欧易生物酵母文库做什么
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