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阳光直射的地方。 细胞培养使用CellASICOONIX2微流体系统进行细胞培养1.从孔中吸出溶液以用于灌注（孔1-5）。向这些孔中添加350μL培养基。确保未使用溶液入口孔中充满了缓冲液。2.清空6号和8号孔，以确保在更换过程中正确交换溶液灌注。3.按照以下说明将微流体板密封到0NIX2歧管上CellASICOONIX2微流体系统用户指南。4打开CellASICOONIX2软件，选择“新建”之一实验选项，然后在下拉列表中找到B04A板。单击协议编辑器选项卡，然后输入所需的步骤，然后情况。对于1-5井，建议的压力为6.9-13.8kPa（1-2psi）可提供足够的营养，并且营养含量极低压力。有关创建协议的信息，请参阅CellASICB《ONIX2微流体系统用户指南》。5.为了监测细胞生长，将

疫检测对照，茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液（10-0.63 ug）被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5％脱脂奶粉（NFDM）的Tris缓冲盐水含0.1％Tweeno 20表面活性剂（TBST），并用一级抗B-Tubulin进行探测（MAB3408）和次级HRP偶联的山羊蚂蚁（AP1 24P）在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道，抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注：请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架，并用中性清洁剂洗涤，然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架，请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方益启生物提供专业的细胞计数器。

IlASICONIX2微流体系统用户图4.细胞捕获机制设置说明指南。微型腔室将细胞轻轻地固定在玻璃上板底漆（可选）表面在基于灌注的分析过程中保持单个焦平面1.如果您的实验需要完全清理去除PBS，请更换实验BOA板的陷阱高度为o.7,0.9,1.1，1.3,2.3和溶液（1-5）和细胞入口（8）中的PBS与150uL您的4.5微米所需的底漆溶液歧管描述2.从6和7孔中吸出PBS溶液。CeIlASICDONK2加热（CAX2-MXT20）或碱性（CAX2-MBC20）3.根据以下说明，将微流体板密封到ONIX2歧管上歧管将微流控板连接到CellASICONX2CellASICONIX2微流体系统用户指南。微流体系统。4打开CellASICONX2软件，选择一种新的实验选项，然后在下拉列表中找到Bo4上海益启生物WB实验加速器订购方便。黄浦区MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck仪器哪家好

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