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提供EdU细胞增殖检测试剂盒优势

来源: 发布时间:2022年06月23日

细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU细胞增殖检测方法通过检测渗入DNA复制期间的EdU,借助荧光检测工具即可准确地检测出新增殖的细胞,快速统计处于S期的细胞百分数,分析细胞增殖情况。该方法简单、灵敏、快速、准确,适合各种细胞系的细胞增殖检测,尤其适用于高通量筛选试验,如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。使用EdU细胞增殖检测试剂盒的好处有哪些?提供EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。提供EdU细胞增殖检测试剂盒优势使用EdU细胞增殖检测试剂盒前的安全检查。

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细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。方式:真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、等一切真核生物中的一种*为普遍的分裂方式,是真核细胞增殖的主要方式。减数分裂是生殖细胞形成时的一种特殊的有丝分裂。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞

与BrdU方法相比,EdU检测方法无需DNA变性,无需抗原修复,无需抗原抗体反应,更简单、更灵敏、更快速、更准确,是细胞增殖检测的比较好选择。更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整;更简单--无需抗原抗体反应,基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,反应单需要几分钟;更灵敏--无需抗体,检测染料单为BrdU抗体的1/500,更容易扩散,即使单个增殖细胞也能准确检测;更快速--无需过夜,省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤,完成整个检测周期单需2.5小时;更兼容--对样品几乎无损伤,更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒的重要性。

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EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。EdU细胞增殖检测试剂盒的优点体现在哪?提供EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调:“与传统的免疫荧光染色不同,EdU反应能在几分钟内完成,且不需要进行严格的样品变性处理,使得组织成像更简单易行。”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo?荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA,简单,快速,准确。这种检测方法非常快速,且只需简单的几个步骤,因此也适用于高通量筛选试验,如在药物筛选中检测加药后细胞的活力提供EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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