小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤：1、于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1min，解剖出完整鼠脑；2、预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗，用眼科剪将皮质反复剪切成碎块；3、移入培养皿中，吸除解剖液加入，37℃培养箱中消化30min；4、将皮层组织碎块移入离心管，弃去剩余消化液，用接种液洗3次，每次洗涤后使组织块充分沉降到试管底，弃去上清液；5、再用接种液1ml混悬，反复吹打（巴氏吸管）混悬液中组织块，力度适中，至浑浊后将上清液移入培养瓶待用；6、加入1ml接种液后再次吹打，如此反复3-4次，组织块逐渐消化后，弃去终残块；7、收集含单细胞悬液的上清液约4-5ml于培养瓶...

研究中一般用到均是现成的细胞系/株，我们只需要：进行细胞传代和保种。然而，这些细胞系常常由于体外长期培养，而丢失原有生物学特性，对药物处理的反应差距越来越大。因此，越来越多的人选择原代细胞。01.什么是原代细胞培养?原代细胞（Primarycells）：是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。组织主要指：组织、外周血及胚胎等。由于原代细胞生长缓慢，繁殖一定的代数停止生长（一般10代以内）。原代细胞与细胞系的区别原代细胞和细胞系的比较_原代细胞细胞系增殖能力较弱强繁殖代数一般只能传10代以内无限增殖50代左右遗传物质完整性遗传物质未改变遗传物质发生改变生物特...

冻存的细胞该如何开始培养？(1)将一管细胞从液氮罐中取出，注意保护手和眼睛。(2)将冻存管快速的放入37℃水浴中，轻轻握住并旋转，直到管内物体完全融化。(3)将冻存管立即从水浴中拿出，擦干，转入无菌环境。(4)用70％的酒精冲洗冻存管，然后擦去多余酒精。(5)打开盖子，注意手指不要碰到里面的螺纹（注意，由于冻存管有负压，开盖时可能会有少量溢出，这是正常现象）。(6)用多聚赖氨酸（或参照说明书）包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。(7)盖好培养瓶的盖子，轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。(8)将培养瓶放入培养箱中（37℃，5%CO2，...