后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件：4℃冰袋运输；短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.***成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，以小鼠为例，每只小鼠体重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。 D-荧光素有时候也叫游离酸。泰州荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐发射波长
4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。2.活ti成像分析1）用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液，混匀。2）用µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，以小鼠为例，每只小鼠体重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入体内10-15min（待光信号达到更强稳定平台期）后进行成像分析。注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定更高信号检测时间和信号平台期。注意事项1）本品（fireflyluciferin）和甲虫荧光素（beetleluciferin）、萤光素钾盐只是不同别名，以CAS号115144-35-9为准。2）注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定更佳信号平台期和更佳的检测时间。3）如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。4）为避免反复冻融，本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃或-80℃保存。为防止氧化，如有条件，可以对储存液充氮气或氩气后保存。泰州荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐发射波长D-荧光素钾盐测试需要满足哪些条件？
Q：荧光素酶作为报告基因相比于荧光蛋白有哪些优势？Luciferase的灵敏度相比于GFP提高10-100倍以上，同时具有更宽的动态范围，便于数值分析比较，不需要荧光显微镜，而且在***实验中其荧光穿透性高于EGFP等荧光蛋白，同时由于没有内源活性、其本底信号很低。而GFP等荧光蛋白相比于荧光素酶的优势在于可以进行失踪定位，并且其观测不需裂解细胞，方便进行适时观察。Q：海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶相比，相对活性如何？在氧、镁和ATP的存在下，萤火虫荧光素酶作用于甲虫荧光素，而来源于海洋腔肠（Renillareniformis)的荧光素酶在氧的存在下作用于海肾荧光素。双报告基因技术（Dual-reporterassays）,结合了萤火虫荧光素酶测试和海肾荧光素酶测试。Q：双荧光素酶报告基因实验转染效率很低而且复孔重复不出来是什么原因？转染效率低的话可以从三个方面改善，首先要确保细胞状态是好的，通常我们选出处于分裂期的细胞，另外阳性对照您可以选择过表达的荧光蛋白质粒，还有就是DNA的质量尤为重要，更好是先酶切验证。这个实验检测结果很灵敏，有一定差异是正常的，通常只要确保它在一个数量级之内即可。如果差异超出这个范围可以从两方面改善，一是记住保持样本的均一性。
短期保存：4℃干燥避光长期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期长期保存：有效期一年工作液：先用现配使用方法1.体外生物发光检测1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3）去除细胞培养基。作者：思存链接：zhuanlan./p/来源：知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权，非商业转载请注明出处。高斯荧光素酶近年来，其他荧光素酶（例如高斯荧光素酶）的使用有所增加，因为这些报告基因较小，并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质，可通过氧气催化腔肠素氧化，产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite™高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒（#AAT-12530）使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时，产sheng发光产物，该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点：提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度。荧光素酶作用下的D-荧光素钾盐。
5）对于检测灵敏度要求特别高的实验，建议使用新鲜配制的本产品。6）在进行D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，从而影响检测。7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。8）本产品只作科研用途！荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称，其中更有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶，分别命名为F-Luciferase和R-Luciferase，同时近年来研究得较多的来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶（Gaussluciferase）。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)，可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光，常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。萤火虫萤光素酶更通用和更常见的报告基因是北美萤火虫photinuspyralis的荧光素酶，该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性。高浓度（体内）甚至没有毒性，可用于原核和真核细胞。运输和保存运输条件：4℃冰袋运输。D-荧光素盐也算是钠盐和钾盐。泰州荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐发射波长
D-荧光素钾盐测试方法是体外生物发光检测。泰州荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐发射波长
荧光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成荧光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段，可以对整个动物体中的细胞群落进行分析：将不同类型的细胞（骨髓干细胞、T细胞等）标记上（即表达）荧光素酶，就可以用高敏感度的CCD相机进行对动物体内进行活ti观察而不会伤害到动物本身。在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以放出荧光，而发出的光子可以被光敏感元件，如荧光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括影响在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。例如，荧光素酶可以被用于检测血库中所存血液中的红血球是否开始破裂。法医可以用含有荧光素酶的溶液来检测犯罪现场中残留的血迹。医院用荧光素酶的发光来发现特定的疾病。荧光素酶还可以作为“报告蛋白”被用于分子生物学研究中，例如，用于在转染过荧光素酶的细胞中检测特定启动子的转录情况或用于探测细胞内的ATP的水平；这一技术被称为报告基因检测法或荧光素酶检测法（LuciferaseAssay）。荧光素酶是一个热敏感蛋白，因此经常被用于研究蛋白热变性过程中热休克蛋白的保护能力。泰州荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐发射波长
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