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CCL16

来源: 发布时间:2022年05月19日

酶联免疫斑点技术(Elispot)技术优势 (1) 单细胞水平,活细胞功能检测:弥补了体液中CK半衰期短的不足,当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT 法检测具有较高灵敏性。 (2) 操作简便经济,可以进行高通量筛选:既可检测自发分泌细胞,又可检测抗原特异性CK分泌细胞,具有较高特异性,并可观察药物治疗反应,且使对CSF中T、B细胞研究成为可能,对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。 (3)灵敏度高:在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。微球免疫分析系统CBA是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法。CCL16

基于luminex平台的xMAP技术: Luminex :应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。 原理: 应用微球和流式细胞仪的原理, 微球内部含有三种免疫荧光, 通过荧光不同的比例可以区分 500 种不同的微球。 每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。 因此, 利用微球技术, 可以同时检测高达 500 个蛋白或基因。 特点: 1、既能检测蛋白,又能检测核酸 2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域 3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标 4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平 CCL16LabEx年多因子检测样本量达20w+!

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramide signal amplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。 然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。

多重荧光免疫组化技术优势 1.由于每次体系中都只有单一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应,以及一抗二抗种属匹配问题,减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。 2.TSA技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪酰胺的信号放大技术能够提供极强的敏感度、检测极微量的目的抗原。极大的降低抗体的用量,节约抗体,实测确实可以提升抗体的稀释比例。 3. 荧光法多重免疫组化,可同时进行五个颜色通道以上,这种情况下发射光谱会重叠,我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所做不到的。这种方法能真实反映关键蛋白的表达情况和相互之间的关系,从而极大地节约珍贵的样品。 LabEx提供 mTOR、JNK、EGFR、STAT等磷酸化率测定。

Q:多因子实验还用的样本类型有可些?
 A:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/ Tissue lysate(细胞/组织裂解液)、Cerebrospinal Fluid(脑脊液)、
BronchoalveolarLavage Fluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、Fluid PeritonealFluid (腹腔液)等等。 Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测? A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。 Q:为什么要做预实验? A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。 
预实验主要目的∶ 
1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。 2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。 3.让研究者在正式实验中有选择的依据。 Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗? A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶
血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。 抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面,形成微阵列。CCL16

LabEx提供流式多因子检测技术(CBA)服务!CCL16

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