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来源: 发布时间:2022年07月08日

dMMR 是 MMR 表达缺失,pMMR 是 MMR 表达正常。dMMR 表现为高频度微卫星不稳定(MSI-H), pMMR 表现为低频度微卫星不稳定(MSI-L)或微卫星稳定(MS-S)。 目前,*常用的筛查结直肠ai MMR 表达有无缺失的方法有 2 种:免疫组化检测 MMR 相关蛋白的表达,以及 PCR 检测多个微卫星位点以判断有否存在 MSI。

下面重点来了: 免疫组化:有缺失,dMMR;无缺失,pMMR 免疫组化主要检测ai组织中 MLH1,PMS2,MSH2 及 MSH6 这 4 种蛋白的表达: 

1. 若结果显示任一蛋白完全缺失,则判读为  dMMR; 

2. 若显示无蛋白缺失,则判度为 pMMR。 所以回到上面的病例: MLH1,PMS2,MSH2 及 MSH6 蛋白均未缺失,应判读为 pMMR,可以用单药 5-Fu 进行辅助化疗。 PCR 检测:≥40%,MSI-H;<40%,MSI-L/MS-S MSI 的分类是基于不同单核或双核苷酸重复序列的改变(如: BAT25、 BAT26、 D5S346、 D2S123 和 D17S250,即 Bethesda 标准微卫星位点)。 迈杰转化医学获得了欧盟ISO 13485质量认证并通过了国家医疗器械GMP稽查。重庆专业dMMR抗体检测试剂创新服务

    结直肠ai是常见的消化道恶性liu,在我国,特别是在现代化发展迅速的大都市里,结直肠ai发病率的上升趋势更为明显。染色体不稳定(chromosomalinstability,CIN)途径和微卫星不稳定(microsatelliteinstability,MSI)途径是结直肠ai发生的两条主要分子途径。前者占散发性结直肠ai的75%,绝大多数存在APC基因的突变和染色体18q的缺失,并有较高比例的KRAS和p53基因突变,好发于左半结肠,组织学类型以高、中分化为主。后者占散发性结直肠ai的15%,多见于右半结肠,组织学类型以黏液腺ai和低分化腺ai为常见,而且几乎所有的Lynch综合征相关性结直肠ai均通过MSI途径发生。更为重要的是,MSI结直肠ai不*在好发部位、常见组织形态上与CIN结直肠ai存在差异,而且在临床预后、***、遗传性liu筛查方案的选择上也有所不同,因此必须在临床工作中将其区分开来。本文主要就MSI结直肠ai、Lynch综合征的病理特点、发生机制、筛查策略及其临床意义做一论述。一、DNA错配修复(mismatchrepair)系统与MSI结直肠ai错配修复系统的功能是纠正DNA复制过程出现的错误,确保复制过程的“保真性”。错配修复蛋白包括MutS和MutL两大家族,前者包括MSH2/MSH3和MSH6等,后者包括MLH1、MLH3、PMS1和PMS2。青海定制dMMR抗体检测试剂推荐咨询迈杰转化医学希望能和创新型药企共同探索创新生物标志物的临床应用潜力。

    50岁,结直肠liu或其他liu家族史阳性、吸烟、超重、有胆囊手术史、血吸虫病史等,可考虑用阿司匹林等非甾体***药和选择性环氧合酶-2抑制剂***,但必须注意药物不良反应及使用禁忌证。二级预防即结直肠腺瘤摘除后预防再发或恶变。目前,学术界比较公认的预防腺瘤切除术后复发的药物是非甾体***药和选择性环氧合酶-2抑制剂。另外,补充钙剂和维生素D、高纤维饮食、肠道代谢物如短链脂肪酸也被认为具有一定的预防价值。2011年发表的《中国结直肠liu筛查、早诊早治和综合预防共识意见(二)》对于我国结直肠ai化学预防给出了明确的指导意见。由于内镜检查依从性较差,结合我国城乡卫生资源分布不均衡的现状,完全依靠内镜下摘除结直肠腺瘤预防结直肠ai发生的方案并非完美。上述共识建议辅助相应以药物或环境干预为基础的一级预防。预防结直肠腺瘤发生或再发是结直肠ai化学预防的**终目的。五、我国结直肠ai筛查及预防工作中的问题1.对结直肠ai认识不足、人群筛查依从性较差:随着我国经济和现代化建设的深入,我国公民饮食结构及生活方式较30年前发生了较大改变,结直肠ai近20年发病率及病死率不断攀升。结直肠ai本身疾病特点鲜明,发病隐匿、恶变时间长、早期liu***率高。

    %的MLH1启动子甲基化或MLH1表达缺失的结直肠ai中存在BRAF基因V600E突变,而且除极个别报道外,BRAF突变几乎从不发生在Lynch综合征相关结直肠ai中,因此检测liu是否存在MLH1启动子甲基化和BRAF基因V600E突变可作为区分散发性MSI-H结直肠ai与Lynch综合征相关结直肠ai的重要参数。2.MSI-H结直肠ai的临床病理特征:Lynch综合征相关性结直肠ai与散发性MSI-H结直肠的临床病理特征大致相同。与MSS结直肠ai相比,MSI-H结直肠ai好发于右半结肠,组织学类型以黏液腺ai和低分化腺ai多见,liu内有明显的上皮内淋巴细胞浸润(tumorinfiltratinglymphcytes,TIL),较少见到腺腔内坏死,liu边缘呈膨胀性浸润,周围可见Crohn病样淋巴细胞聚集(图1),淋巴结转移发生率较低。相对于Lynch综合征,散发性MSI-H结直肠ai发病年龄较大,女性相对多见,更易发生在右半结肠。图1MSI-Hliu的形态特点;liu呈低分化或伴黏液分化,伴***的上皮内淋巴细胞浸润(A,HE中倍放大),liu前缘呈膨胀性浸润,周围见Crohn病样淋巴细胞聚集灶(B,HE低倍放大)尽管MSI-H结直肠ai的病理特征与MSSliu存在一定差别,但除TIL外,其他形态指标的特异性和敏感性均较低,即使结合发病年龄等因素(<60岁)。迈杰与大学,研究院所,医院的科研人员进行科研转化研究合作,包括基础科学研究及临床应用研究等。

    将培养的菌液转接到500mllb液体培养基混合,37℃,200rpm,培养至od=,iptg()低温过夜诱导。400ml大离心筒,6000rpm,离心5min收集菌体,弃上清。沉淀用20-30ml10mmtris-hcl()和终浓度为,超声破碎菌体。12000rpm离心20分钟,取离心上清上样到ni-nta镍柱(qiagen)进行纯化,之后分别用含15mm咪唑、60mm咪唑、300mm咪唑的10mmtris-hcl()(含)溶液洗脱,分别收集蛋白峰,电泳检测,备用;所制备的重组蛋白,蛋白浓度为,纯度为80%。图1为纯化后重组msh6蛋白的电泳结果图,其中m:分子量标记、1::、实施例2abm58060-20a2-pu杂交瘤细胞系的建立一、免疫将实施例1中的重组蛋白用弗氏完全佐剂(sigma公司,f5881)乳化,免疫icr小鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司),腹部皮下注射每只小鼠6点,剂量为60μg/只。每14天加强免疫一次,抗原使用弗氏非完全佐剂(sigma公司,f5506)乳化,剂量为30μg/只。第3次加强免疫后7天,msh6-1蛋白,2ug/ml,4℃包被过夜,elisa检测小鼠血清中抗免疫原的多抗效价,效价比较高的小鼠以尾静脉注射冲击免疫,抗原用生理盐水混匀,剂量为50μg/只。二、细胞融合:无菌制备免疫达标的小鼠脾细胞悬液,与小鼠骨髓瘤细胞sp2/0。迈杰基于基因组学、蛋白组学、细胞组学及病理组学等综合性转化医学平台,丰富的伴随诊断开发经验。安徽专注dMMR抗体检测试剂技术指导

迈杰转化医学拥有全技术平台及丰富的伴随诊断开发经验,为药企合作伙伴提供一体化开发服务。重庆专业dMMR抗体检测试剂创新服务

    免疫组化(IHC)技术服务根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,***通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。应用领域在人类步入新世纪后,免疫组化技术在liu研究中的应用也进入了一个新时代,随着越来越多新型、实用型抗体的出现及各种抗体新用途不断被发现,免疫组化技术已进入多标记和定量研究的阶段,使得该技术不**是liu学研究和诊断的重要方法,它已经日益***地应用于医学各领域中,其结果已成为疾病诊断的依据或诊断标准的重要内容。重庆专业dMMR抗体检测试剂创新服务

迈杰转化医学研究(苏州)有限公司于2013年成立,其前身为凯杰(苏州)转化医学研究有限公司。基于基因组学、蛋白组学、细胞组学及病理组学等综合性转化医学平台,丰富的伴随诊断开发经验,高质量的管理体系以及高素质的研发管理团队,迈杰转化医学为全球合作伙伴提供***生物标记物发现、靶点验证、新药临床试验病人的分型研究和入组筛选、伴随诊断开发与商业化、患者用药指导检测等一体化解决方案,并已迅速发展成为中国伴随诊断领头创新企业,致力于解决创新药物的研发痛点及患者的用药痛点,助力精细医疗!

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