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来源: 发布时间:2022年07月06日

液态流式技术(Luminex)流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等,是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体,多指标并行分析,可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点;可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。基本原理:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达100个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。多因子实验的正式实验,可以分批次检测。IL17B

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。IL17BLabEx提供MSD超敏电化学发光平台服务!

产生组织切片非特异性染色的原因有哪些?如何解决?1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;4)、非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果;5)、DAB孵育时间过长或浓度过高;6)、PBS冲洗不充分,残留抗体结果增强着色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要;7)、标本染色过程中经常出现干片,这容易增强非特异性着色。

基于MSD平台的电化学发光超敏多因子检测技术MSD(MesoScaleDiscovery)原理:MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESOSector600或QuickplexSQ120。通过点阵技术,在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里定制实现100指标/孔的筛选检测。特点:1、更高灵敏度与更宽的线性范围:灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log。2、节省样本用量,可实现多重检测:上样量≤25ul,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。3、均一性、重复性高:板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月,为长时间研究项目,提供了使用同一批号试剂的可能性。4、样本兼容度高,基质效应小5、实验流程简便、快速、多元化6、信号稳定且不受显色顺序影响7、开放性平台,高载量的石墨电极,多样化实验方案,更节省的包被用量。LabEx 因子检测技术有Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD等。

炎症相关的生物标志物包括:(1)肠道微生物因子:肠道菌群可能受到饮食,益生菌,益生元,外源酶,粪便菌群移植和其他环境因素的影响(2)免疫相关:肠道菌群驱动炎症的扩大,细胞浸润固有层,包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子,包括TNF,IL-1β,IFN-γ和IL-23/Th17细胞途径。(3)炎症介质:如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子(如IL-12,IL-23,IL-17,IL-18和TGF-β)等。LabEx提供抗体芯片技术(Antibody Array)服务!IL17B

LabEx抗体芯片主要用于蛋白表达谱、蛋白质磷酸化及蛋白质相互作用等检测。IL17B

HALO分析平台LabEx始终致力于为您的研究需要,提供前沿的多因子技术平台,用心服务,现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台,助推科研进步!技术介绍LabEx数字病理图像分析平台,为您提供病理图像分析的全套解决方案,包括可进行高通量、全切片式的组织分析的图像分析的病理图像分析平台HALO。凭借其易用性和可扩展性,在免疫肿块物学、肿块物学、移植科学、神经科学、眼科、代谢、呼吸和病理学等领域有着较广的应用。目前HALO数字病理图像分析平台用户遍布于全球的生物制药公司、医疗和研究组织。IL17B

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