如果说明书上没有具体的说明,如何重溶(Reconstitute)冻干的重组蛋白?我们建议采用以下方式:(1)将试剂瓶和重溶缓冲液平衡至室温。(2)短暂离心试剂瓶以确保在小瓶底部收集所有冻干物。(3)加入推荐的重溶缓冲液,达到产品说明上推荐的浓度。避免剧烈振荡或移液器吹打,这可能导致蛋白质变性。(4)使试剂瓶在室温下重溶15-30分钟,可使用360度摇床或手动轻轻上下颠倒。(5)每管体积不小于10μL分装,并按产品说明书上的指示储存。(6)如果小瓶内呈现薄片或颗粒,则在室温下将产品混合几小时,然后在4℃过夜。45.苏州近岸蛋白专注生物医药领域中的重组蛋白质。人TGF重组蛋白
R&D Systems作为全球免疫学和细胞生物学产品的生产商,1976年创立于美国明尼苏达州,至今已为学术界服务近40年。其母公司Bio-Techne(原Techne公司)于1983年在美国NASDAQ上市。目前,R&D Systems拥有近30,000种产品,95%以上由自己研发生产。其产品包括重组蛋白、细胞因子、ELISA试剂盒、生长因子、趋化因子、抗体、Animal-Free™蛋白、Luminex 液相芯片、多因子检测固相芯片、流式细胞分析与细胞筛选、干细胞及细胞培养等;覆盖发育、糖生物、内分泌、免疫、神经学、蛋白酶、信号传导等学科研究领域;且每年有近2,000种新产品不断问世,以满足不同科研工作者的研究需要。PeproTechMMP-3重组蛋白重组蛋白的生物学活性定义。
在生物学研究和蛋白质功能研究中,常用的方法之一是重组融合蛋白,简称融合蛋白。重组融合蛋白是由两个或两个以上原为不同蛋白质编码的基因组合而成的。由融合基因翻译而来的包含单个或多个多肽的重组融合蛋白获得了来自每个原蛋白的功能特性。融合蛋白有三个重要的用途:帮助纯化克隆基因,报告表达水平,作为组织化学标签,使蛋白质在细胞、组织或有机体中的位置可视化。在重组蛋白纯化中,重组融合蛋白法通常用于亲和层析,在亲和层析中,将易于纯化的蛋白与研究人员希望研究的蛋白相连接。许多蛋白质和多肽已被用作融合标签,包括谷胱甘肽- s -转移酶(gst标签)、麦芽糖结合蛋白(mbp标签)、多组氨酸(his标签)、人类生长因子、泛素和抗体表位。此外,β-半乳糖苷酶、荧光素酶和绿色荧光蛋白(GFP)通常作为部分蛋白表达和定位的报告因子。
客户购买的重组蛋白一般为装在塑料管中的冻干粉,冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上,所以在打开塑料瓶盖前,需将冻干粉通过离心收集到管底,以便用很小体积的液体即可将冻干粉完全溶解。那么应该用多少转速、多长时间离心试剂管,才能达到良好的收集效果?答:有些小型高速离心机(多为进口品牌)的面板上有一个Spin键,按了此键后,离心机会自动快速上升到速度(10000rpm或12000rpm),上升后速度即刻下降,直至停止旋转,整个过程大约30s。这个Spin键足以很好的将细胞因子或蛋白收集到管底。但有些实验室没有这样的高速离心机,只有转速为4000-4500rpm的离心机。这种情况下,需3000-3500rpm离心5min,也能达到类似的效果。溶解后的重组蛋白如何保存?
量化生产的重组蛋白种类有限,如果购买不到所需蛋白,则需要重组蛋白定制服务。对于特定的应用,使用正确的蛋白表达系统是实验成功的因素。以义翘神州为例,义翘神州的重组蛋白表达服务,拥有多年的重组蛋白表达经验,提供从基因合成、载体构建到蛋白表达及纯化的一站式服务。拥有多种重组蛋白表达系统,包括原核生物蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统(杆状病毒)、哺乳动物细胞蛋白表达系统。具备多种纯化体系,为蛋白表达与纯化方面提供多种选择。自公司成立以来,已成功表达约6000 个毫克至克级的不同种属的重组蛋白。每年1000个新蛋白的研制和生产能力以及快速解决研发和生产问题的能力。拥有近百个2L 到1000L 不同体积的发酵罐和超过30 种重组蛋白纯化体系,可以满足高通量及大规模的重组蛋白表达需求。重组蛋白的保存和运输条件。小鼠IL-6重组蛋白
重组蛋白生物科研试剂总体市场逐年递增。人TGF重组蛋白
重组蛋白的细菌表达系统有各种各样的载体和宿主菌可供选择,大部分工程菌的增殖时间短,不仅便于快速评价实验结果,而且降低了技术和设备无菌要求的严格性。无害大肠杆菌是肠道正常微生物群的一部分与生物体为共生关系,可以通过产生维生素K 2使机体受益,并防止病原菌在肠道增殖。大肠杆菌是用于重组蛋白生产的宿主菌,它不仅具有遗传背景清楚、培养操作简单、转化和转导效率高、生长繁殖快、成本低廉,可以快速大规模地生产目的蛋白等优点,而且其表达外源基因产物的水平远高于其它基因表达系统,表达的目的蛋白量甚至能超过细菌总蛋白量的30%,对小分子蛋白的生产具有极大的优势,因此大肠杆菌是目前应用多的重组蛋白质表达系统。人TGF重组蛋白
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