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常熟DMEM(高糖)培养基(含双抗)

来源: 发布时间:2022年07月03日

血清是细胞培养过程中常用的生物试剂,市面上有很多种类的血清,现在就来给大家介绍其中的一款——透析胎牛血清。透析胎牛血清是采用透析的方法,过滤去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷:次黄嘌呤和胸腺核苷等、胆固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的细胞实验,比如:需要避免细胞培养基中一些小分子干扰的实验。使用放射性标记小分子,对生物合成过程进行监测,以研究蛋白质等大分子的生化性质、合成、加工、细胞内传送、分泌和降解过程。这时,常将细胞放在含有充足养分和放射性标记氨基酸(如35S标记的蛋氨酸或半胱氨酸)的培养液中进行标记。为避免外源未标记的氨基酸的干扰,这时所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基础培养基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。真正的胎牛血清,一般表现出微红色或橘红色。常熟DMEM(高糖)培养基(含双抗)

胎牛血清给细胞提供的益处主要体现在6个方面:1、提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。2、提供天然的结合蛋白,能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等,能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多个钙离子结合位点,因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。3、天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分,促进细胞的附着、铺展。4、提供消毒功能。这主要通过血清中的某些蛋白与有毒的金属离子结合来完成的。如金属硫蛋白,对多种重金属有高度亲和性,并可清理细胞生长环境中的氧自由基(·O),具有很强的抗氧化活性,可防止细胞衰老。5、提供酸碱度缓冲的作用,以及维持渗透压。6、提供蛋白酶抑制剂,使细胞免受蛋白酶的损伤。因此在细胞消化时,常用含血清的培养液终止胰酶对细胞的作用。邳州类胎牛血清Fetal Bovine Serum (Similar)胎牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成分。

胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。胎牛血清各项质量指标符合2005版《中华人民共和国药典》第三部附录的要求。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)4、无菌检验:阴性。5、支原体检验:阴性。6、细菌内有害元素≤5(EU/ml)7、牛腹泻病毒,阴性,8、大肠杆菌噬菌体,阴性,9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)更大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间≤15h,克隆率≥85%。

什么是优良的胎牛血清?免疫球蛋白,国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采集血液的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。维生素含量,此外,维生素的使用也是要考虑在内的。国内外的血清,都不对维生素进行测试(无四环素胎牛血清理外)。其中,由于国外维生素使用较为严格,用量有限,同时每头奶牛的产品包括血清都可以追溯源头,所以国外胎牛血清不含维生素或者含量极低。但是国内由于维生素使用普遍,血清中残留量很高,导致国产血清质量很差,不利于细胞培养。胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。

胎牛血清都有哪些重要的指标:总蛋白含量,胎牛血清的总蛋白含量一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采集血液的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。pH值,根据药典,胎牛血清的pH值在7.0-8.0之间,并没有什么具体依据把进口血清和国产血清用7.5这个分界线界定。渗透压,胎牛血清渗透压的检测一般采用冰点法,渗透压摩尔浓度(mOsmol/kg):280-360之间。微生物,包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体等。随着各个品牌血清生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。支原体通过0.1um3次无菌过滤去除。关于噬菌体主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清理,但对血清质量影响不大,不过对于工业生产的客户来说,往往会采用γ照射的胎牛血清来避免噬菌体。胎牛血清在消化过程中提供蛋白酶抑制剂,在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。徐州哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

胎牛血清100纳米过滤,过滤材料符合美国药典的生物安全性标准。常熟DMEM(高糖)培养基(含双抗)

血清中出现沉淀的原因很多:反复的冻融会使血清脂蛋白发生变性造成浑浊,可通过分装成单次用量减少冻融来尽量避免此种情况。血清是在低温环境下迅速加工以保持其生长特性,血清中遗留的一些纤维蛋白原在解冻时会转化成纤维蛋白。过量的纤维蛋白在血清中呈现为可见的絮状物质,可通过400xg离心移除。不建议通过过滤血清来移除絮状物质,因为滤器可能堵塞,或者意外截留到重要的蛋白质。牛血清产品检测项目包括内有害元素、细菌、菌体、霉菌、支原体和噬菌体检测吗?胎牛血清采用非常严谨的标准检测过这些相关微生物的污染,具体可以参加每批次的CoA。什么是γ辐照的血清(胎牛血清)?γ辐照的血清通过暴露于放射性60Co产生的25-40kGy剂量的γ射线来灭活病毒和其他外来微生物(比如支原体)。γ辐照处理不影响血清的理化性质或细胞培养性能。常熟DMEM(高糖)培养基(含双抗)

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