产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？如何解决？1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；4)、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；5)、DAB孵育时间过长或浓度过高；6)、PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要；7)、标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。MSD作为现阶段灵敏度较高的检测技术，常用于常规生物标志物检测和信号通路研究。CXCL5
单细胞功能组学（IsoPlexis）技术优势>在看似同质的细胞亚群内研究异质性>利用功能蛋白质数据层和免疫细胞比较免疫应答情况>通过多功能强度指数（PSI）建立参考点>优化试验以预测区分应答者和非应答者>表征导致身体状况/应答的生物学和功能驱动因素技术原理采用微流控技术，通过12,000个亚纳升级别的微室同时捕获上千个单细胞。搭配IsoCode芯片抗体条形码技术，捕获每个小室中单个活细胞分泌的多重蛋白质，或者对单细胞裂解后释放出的多种磷酸化蛋白进行捕获，然后通过基于ELISA原理的全自动化蛋白检测技术，捕获多重蛋白的荧光信号，一次可采集多达30种以上的功能蛋白质。在检测中从每个单细胞获得的蛋白质组信号将无缝传输到IsoSpeak生信分析软件，进行全自动分析和可视化呈现，并可直接用于文章发表。CXCL5LabEx，多因子实验服务专家！
Q：多因子实验还用的样本类型有可些?A：Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）、FluidPeritonealFluid（腹腔液）等等。Q：多因子实验中血清好检测，还是血浆好检测?A：文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验，具体需研究者根据自己实际条件选择。Q：为什么要做预实验?A：试剂说明书中的样本稀释比例不精确，需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例，让尽可能多的因子在检测范围内，从而提高检出率。2.避免样本浓度过高，导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q：血清血聚溶血，对实验结果有形响吗?A：肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的，轻微溶血都是可以接受，但从溶血的严重程度看区别较大，样本普遍存在些许溶血情况，从目前文献上看没有明确的数据支持。
抗体蛋白质芯片技术（Sengenics）优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位，可用于自身抗体结合（90%的抗体表位是非线性的）。与显示低信噪比的其他阵列相比，这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限＜10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体，只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内，线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时，0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。LabEx 提供人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、信号通路重要指标多因子组合检测。
LUMINEX常见问题及解答（一）1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何？灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul，每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性？检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。LabEx 多因子检测平台：抗体芯片，液相芯片，电化学技术为主的多种检测技术。CXCL5
LabEx 免疫组化服务：包括DAB染色、HE染色、Masson染色、免疫荧光（IF）。CXCL5
单细胞功能组学（IsoPlexis）LabEx始终致力于为您的研究需要，提供前沿的多因子技术平台，用心服务，现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA，MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台，助推科研进步！产品特点作为蛋白组学全新技术，为了解答免疫应答相关问题，研究人员经常需要制定策略及技术。功能蛋白质组学主要利用分泌蛋白质组在免疫应答启动和调节中的重要作用，并与细胞信号转导建立直接关联。通过测量与免疫应答直接相关的功能性细胞外细胞因子，以实现完整的细胞定义。在看似同质的细胞群体中，总是存在不同程度的细胞异质性。当我们在单细胞水平上研究和表征细胞功能时，尤其如此。一整群细胞的行为通常是由一小群多功能性的细胞亚群驱动的，它可能只占当前所有细胞的20-30%。该技术可通过对每个免疫细胞进行功能性免疫谱分析，实现完全的单细胞功能表征，从而帮助发现更好的生物标记物，加速医治开发。检测罕见的“超级细胞”亚群，以揭示持久性、效力和耐用性等功能性生物学驱动因子。CXCL5
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